El silenciamiento de la reparación final de la unión para la inserción de genes de sitio específico eficiente después de la mutagénesis TALEN / CRISPR en Aedes aegypti

  1. Editado por Anthony A. James, de la Universidad de California, Irvine, CA, y aprobado 24 de febrero 2015 (recibido para revisión 06 de febrero 2015)

Significado

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Los mosquitos son vectores de ambos parásitos y virus responsables de enfermedades de alto impacto como la malaria, el dengue y el chikungunya. Intervenciones en novela basada en la modificación genética del genoma del mosquito se están desarrollando e implementando actualmente. Para explotar exhaustivamente este tipo de intervenciones, se requiere un conocimiento detallado de la fisiología de mosquitos, la genética y la ingeniería del genoma.

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Hemos desarrollado y validado un proceso de dos pasos para llevar a cabo la inserción específica de sitio de alta eficiencia de material genético en el genoma del mosquito mediante la evaluación de candidatos primera nucleasas específicas del sitio en un formato rápido, seguido de edición basada en la línea germinal donde la elección de DNA es respuesta de reparación y está limitado. Este modelo debería acelerar significativamente tanto la investigación relativa a los mosquitos básicos y aplicados de vectores de enfermedades.

Abstracto

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Las estrategias de control convencionales para los patógenos que son transmitidos por mosquitos, como la malaria y el dengue están siendo complementadas por el desarrollo de cepas de mosquitos transgénicos reprogramadas para generar fenotipos beneficiosos tales como la esterilidad condicional o la resistencia a patógenos. El éxito generalizado de nucleasas específicas de sitio, tales como las nucleasas de transcripción del tipo activador de efectoras (Talens) y agrupados espaciadas regularmente repeticiones palindrómicas cortas (de CRISPR) / Cas9 en organismos  el modelo también sugiere que los sistemas de accionamiento gen reprogramables basados ​​en estas nucleasas pueden ser capaces de propagar tales fenotipos beneficiosos en las poblaciones de mosquitos silvestres. Utilizando el mosquito Aedes aegypti , se determinó que las mutaciones en el dominio FokI utilizado en Talens para generar complejos heterodiméricos obligados sustancialmente y reducir significativamente las tasas de edición de genes.

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Encontramos que CRISPR / edición basada en Cas9 en el mosquito Ae. aegyptitambién es muy variable, con la mayoría de los RNAs guía incapaz de generar edición detectable. Mediante la evaluación de primera guía RNAs siendo candidato utilizando un ensayo de embrión transitoria, hemos sido capaces de identificar rápidamente guía RNAs altamente eficaces; centrándose experimentos basados ​​en la línea germinal sólo en esta cohorte resultó en consistentemente altas tasas de edición de 24-90%. La microinyección de ARN de doble cadena dirigidos Ku70 o lig4 , ambos componentes esenciales de la respuesta final de la unión, el aumento de la reparación basada en la recombinación en los embriones tempranos como se determina por los reporteros basados ​​en plásmidos.

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Supresión basado en RNAi de Ku70 concurrente con la microinyección de embriones de nucleasas específicas de sitio produjo consistentes frecuencias de inserción génica de 2-3%, similar a transposon- tradicional o métodos de integración basados ​​en C31, pero sin el requisito de un paso inicial de acoplamiento. Estos estudios deben acelerar en gran medida las investigaciones sobre la biología del mosquito, agilizar el desarrollo de cepas transgénicas para las liberaciones de campo, y simplificar la evaluación de los sistemas de transmisión de genes novedosos basados ​​en Cas9.

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Fuente:

http://www.pnas.org

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GRADOS Y ESTADOS DE ÁNIMO SUFREN POR LOS NOCTÁMBULOS ADOLESCENTES

SALUD Y MEDICINA

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“Este importante estudio añade a la evidencia ya está claro que los jóvenes que son amantes de la noche tienen un mayor riesgo de resultados adversos”, dice la psicóloga Allison Harvey, autor principal del artículo. ”Ayudar a los adolescentes van a la cama temprano puede ser una vía importante para reducir el riesgo.” (CréditoOwen Davis / Flickr)
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GRADOS Y ESTADOS DE ÁNIMO SUFREN POR LOS NOCTÁMBULOS ADOLESCENTES

UNIVERSIDAD DE CALIFORNIA, BERKELEYderecho estudio originalPublicado por  en14 de noviembre 2013 

FUENTE QUE UTILIZO:

http://www.futurity.org

Los adolescentes que se acuestan tarde durante el año escolar son más propensos a las dificultades académicas y emocionales a largo plazo, en comparación con los adolescentes que acuden a principios.

Los investigadores analizaron los datos longitudinales de una cohorte representativa de 2.700 adolescentes estadounidenses de los cuales el 30 por ciento informó de la hora de dormir antes de las 11:30 pm del día escolar y 1:30 am en el verano en sus años de secundaria y preparatoria.

En el momento en que se graduaron de la escuela secundaria, los amantes de la noche el año escolar tuvieron menores puntajes GPA, y eran más vulnerables a los problemas emocionales que los adolescentes con acueste más temprano, según el estudio publicado en el Journal of Adolescent Health.

Los resultados presentan un argumento de peso a favor de los tiempos de inicio de clases después secundarias y preparatorias de cara a intensas presiones académicas, sociales y tecnológicos, los investigadores dice.

(Crédito: Charlotte Spencer / Flickr) 
(Crédito: Charlotte Spencer / Flickr )
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EXPRIMIR TODO EN

“Las presiones académicas, programas después de la escuela ocupada, y el deseo de que por fin el tiempo libre al final del día para conectarse con amigos en el teléfono o en línea que este problema sea aún más difícil”, dice Lauren Asarnow, autor principal del estudio y un estudiante graduado en la Universidad de oro del sueño oso de California Berkeley y la Clínica de Investigación del estado de ánimo.

En una nota positiva, se dice que los resultados ponen de relieve cómo un ciclo de sueño saludable promueve el éxito académico y emocional de los adolescentes.

“La buena noticia es que la conducta del sueño es altamente modificable con el apoyo adecuado,” dice Asarnow, citando la UC Berkeley estudio del sueño adolescente , un programa de tratamiento diseñado para restaurar los relojes biológicos de los adolescentes que tienen problemas para ir a dormir y despertar.

Este último estudio utilizó datos del Estudio Longitudinal Nacional de Salud Adolescente , que ha seguido las influencias y conductas de los adolescentes desde 1994.

Centrándose en tres períodos-el tiempo de inicio de la pubertad, un año más tarde y la juventud-investigadores compararon cómo los hábitos de sueño de los adolescentes de 13 a 18 años 2700 afectaron su desarrollo académico, social y emocional. Se miraron el expediente académico de los participantes y otros datos de educación y salud.

Al ir a la cama tarde en el verano no pareció afectar su rendimiento académico, incluyendo las calificaciones, los investigadores encontraron una correlación entre la hora de dormir de verano posteriores y problemas emocionales en la edad adulta.

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CAMBIOS DEL CICLO DEL SUEÑO EN LA PUBERTAD

Las encuestas muestran que muchos adolescentes no reciben la cantidad recomendada de nueve horas una noche de sueño, e informan tener problemas para mantenerse despierto en la escuela. El ritmo circadiano humano, que regula las funciones fisiológicas y metabólicas, típicamente se desplaza a un ciclo de sueño más tarde en el inicio de la pubertad. Los investigadores teorizan que una “noche de preferencia circadiano” en la adolescencia es una confluencia de factores biológicos, así como la vigilancia de los padres, las presiones académicas y sociales, y el uso de dispositivos electrónicos.

Por ejemplo, se ha encontrado que las luces brillantes asociados con las computadoras portátiles, teléfonos inteligentes y otros dispositivos electrónicos para suprimir la melatonina, una hormona que ayuda a regular el ciclo del sueño. El estudio del sueño adolescente anterior utiliza la iluminación tenue y la tecnología límites antes de acostarse, entre otras intervenciones, para ayudar a revertir esta tendencia lechuza.

“Este importante estudio añade a la evidencia ya está claro que los jóvenes que son amantes de la noche tienen un mayor riesgo de resultados adversos”, dice la psicóloga Allison Harvey, autor principal del artículo. ”Ayudar a los adolescentes van a la cama temprano puede ser una vía importante para reducir el riesgo.”

Fuente: Universidad de California en Berkeley

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